一、茶黃堿是什么?
1:茶黃堿:學(xué)名為1,3-二甲基黃嘌呤。又稱茶堿,系可可堿同分異構(gòu)體。呈白色無(wú)臭的結(jié)晶性粉末,熔點(diǎn)269~274℃;略溶于冷水、乙醇或氯仿,易溶于熱水,難溶于乙醚;具有二性化合物性質(zhì),酸性比可可堿強(qiáng)。
2:茶葉生物堿中,最重要的是咖啡堿、可可堿、茶葉堿。在環(huán)中不同氮原子位置上連有不同個(gè)數(shù)甲基,因此屬黃嘌呤衍生物,亦稱甲基化黃嘌呤。咖啡堿一般占干物量的2~4%,可可堿約含0.05%,茶葉堿約含0.002%,都具有重要的生理功能
二、茶堿怎樣甲基化?
可考慮用碘甲烷、甲基氯化鎂或者硫酸二甲酯等烷基化溶劑對(duì)茶堿接枝甲基位。
三、如何驗(yàn)證bisulfite sequencing的結(jié)果
BSP測(cè)序是DNA甲基化檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。我想如果BSP能得到陽(yáng)性結(jié)果,就沒(méi)有必要再做MSP了或其他了。
如果非得做MSP,而且有連續(xù)的CpG區(qū)域,應(yīng)該能看得出區(qū)別的,雖然U,M很可能都有條帶。要得出漂亮結(jié)果,可能還得反復(fù)摸索條件。
另外,可以考慮是否有CpG區(qū)域在重亞硫酸鹽處理后出現(xiàn)新的酶切位點(diǎn),或者原有酶切位點(diǎn)在經(jīng)重亞硫酸鹽處理后消失(即所謂COBRA法),然后通過(guò)酶切手段來(lái)檢測(cè)甲基化的變化。
四、甲基化的過(guò)程?化學(xué)式
有機(jī)化學(xué)的甲基化是指一個(gè)烷基化的過(guò)程傳送一個(gè)CH3基團(tuán)。這個(gè)過(guò)程一般都會(huì)使用親電子的甲基源,如碘代甲烷、硫酸二甲酯、碳酸二甲酯,或是較少有但更強(qiáng)力的甲基化試劑,如三氟甲基磺酸甲酯或氟代磺酸甲酯。這些試劑都會(huì)經(jīng)SN2親核取代反應(yīng)進(jìn)行甲基化。例如一個(gè)烷氧鹽(RO-)可以在氧氣中被甲基化產(chǎn)生醚(ROCH3)?;蚴且粋€(gè)烯醇酮在碳中被甲基化產(chǎn)生一個(gè)新的酮?;蛘?,甲基化可以涉及使用親核的甲基化合物,如甲基鋰(CH3Li)或格林尼亞試劑(CH3MgX)。例如,CH3Li可以在丙酮加上一個(gè)羰基(C=O),使之甲基化,并產(chǎn)生叔丁酯的鋰烷氧
中國(guó)在這方面的研究還剛剛開(kāi)始。關(guān)于汞的生物甲基化和微生物抗汞機(jī)理雖比其他金屬轉(zhuǎn)化機(jī)理清楚,但有不同的見(jiàn)解和學(xué)說(shuō)。微生物法除汞的研究,目前僅限于配水和小型試驗(yàn)。關(guān)于汞轉(zhuǎn)化的遺傳學(xué)控制研究在理論和實(shí)踐上都具有重要意義。